2×高保真PCR預混液(PCR系列)
更新時間:2025-01-07
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2×高保真PCR預混液(PCR系列)
1. 產品描述:
信勵致和®2×高保真PCR預混液包含Pfu DNA Polymerase、dNTP 以及優(yōu)化的緩沖體系,只需加入引物和模板即可進行擴增,減少了移液操作,提高了檢測通量和結果的重現(xiàn)性。體系中加入的保護劑使得Pfu DNA Polymerase經過反復凍融后仍可保持穩(wěn)定的活性;體系中不包含電泳指示劑。通過改造,信勵致和的Pfu DNA Polymerase在長片段擴增能力、擴增特異性以及擴增產量方面得到了大幅度提升。其錯配率是普通Taq酶的1/83,用于細菌、真菌、植物組織、動物組織的直接PCR,擴增產物為平端。
2. 產品特點:
(1)本產品為高保真PCR擴增試劑,產品的反應靈敏度高,擴增的特異性好。
(2)本產品可進行長片段基因擴增,使用 λDNA、質粒等簡單模板,可以有效擴增長達15 kb的片段;使用基因組DNA等復雜模板,可以擴增長達10 kb的片段。
3.用途:
長、短片段高保真DNA片段擴增。
2×高保真PCR預混液(PCR系列)
1. 產品組分:
組分/含量 | AB0111 | AB0112 |
2×Pfu PCR Mix | 1 mL | 5×1 mL |
2. 儲運條件:
-25~-15℃保存12個月,干冰運輸。
3. 注意事項:
使用前混勻,產品避免反復凍融。
1. 產品擴增效果測試:
在一致條件下,以2000 bp的λDNA和5000 bp的質粒為模板進行擴增測試,結果如上圖所示,我司的2×高保真PCR預混液擴增產物量明顯高于市場典型競品,本產品具有很好的擴增效果。
2. 擴增模板兼容性測試:
使用2×高保真PCR預混液分別以λDNA、質粒、基因片段為模板進行目的片段擴增,實驗結果如上圖所示,測試使用的三種模板,本產品均能成功完成擴增,實驗結果有力地證明了本產品的模板兼容性好。
常見問題
1. 產物沒有或很少?
原因分析:模板濃度過低;實驗樣品DNA損傷或降解;PCR條件未優(yōu)化;退火溫度過高;延伸時間太短;循環(huán)次數太少;引物設計不完善;引物濃度過低;Mg2+濃度未優(yōu)化;模板質量太差。
解決方案:建議DNA樣品不要反復凍融,以免造成DNA的損失;優(yōu)化PCR條件,對于基因片段較長的片段適當增加延伸時間,增加循環(huán)數。
2. 產物為多條帶?
原因分析:引物濃度為優(yōu)化或者引物降解;退火溫度過低。
解決方案:建議將引物置于4℃或者-20℃保存;適當調整退火溫度。
3. 產物有污染?
原因分析:模板用量過多;Mg2+濃度未優(yōu)化;PCR中的長片段來源于長的基因組DNA。
解決方案:適當減少模板用量;盡量使用雜質含量少的模板進行擴增。